产品货号：
GS5127
中文名称：
ApaI限制性内切酶
英文名称：
SwiftCut ApaI Restriction Endonuclease
产品规格：
200T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
酶切位点：
酶活定义：
37℃条件下，在20μL通用SwiftOne反应体系中，1μL酶能够在15min内完全消化1μg p615 DNA所需的ApaI酶量。
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
质量控制：
注意事项：
使用方法：
附录参考：
常见DNA中ApaI酶切识别位点数：
双酶切或多酶切：
相关搜索：ApaI限制性内切酶，ApaI内切酶，ApaI限制酶，，SwiftCut ApaI Restriction Endonuclease
SwiftCut系列限制性内切酶是一系列能够在5～15分钟之内快速剪切DNA的快速酶。所有SwiftCut限制酶都适用于通用的SwiftOne缓冲液，可在统一反应体系内任意组合，无需多次单酶切或更换酶切缓冲液。SwiftCut系列限制性内切酶经过多个严格的质控环节，适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。
酶切位点：
5'…G G G C C↓C…3'
3'…C↑C C G G G…5'
3'…C↑C C G G G…5'
酶活定义：
37℃条件下，在20μL通用SwiftOne反应体系中，1μL酶能够在15min内完全消化1μg p615 DNA所需的ApaI酶量。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| SwiftCut ApaI内切酶 | 200μL |
| 10×SwiftOne缓冲液 | 1mL |
保存：-20℃，有效期1年。
质量控制：
- 超长时间孵育/星号活性检测：37℃下，在20μL反应体系中，将1μL SwiftCut ApaI与1μg p615 DNA共同温育3h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。但更长时间孵育可能出现星号活性。
- 酶切-连接-再酶切检测：37℃下，使用10倍酶量消化底物，回收酶切产物。在22℃下使用适量T4 DNA连接酶可以将超过95%的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开超过95%的连接产物。
注意事项：
- DNA甲基化对ApaI酶切的影响：
Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI 不影响 剪切受影响 剪切受影响 不影响 不影响 - ApaI的同裂酶：Bsp120I、PspOMI。
- 热失活：在80℃加热20min失去活性。
- 当盐浓度高于50mM时，ApaI的活性受到抑制。
- 本制品专为研究而设计，仅在体外使用。不适用于人或动物诊断等体内实验。
使用方法：
- 建议酶切反应
- 按下表加入各成分配制酶切反应体系。
成分 用量 无核酸酶水 16μL 10×SwiftOne缓冲液 2μL DNA (0.5～1μg/μL) 1μL SwiftCut ApaI内切酶 0.5～1μL - 轻轻混匀并瞬甩几秒钟。
- 37℃孵育15分钟(质粒)，或15～30分钟(PCR产物)，或30～60分钟(基因组DNA)。
- 80℃孵育20分钟即可使酶失活，停止反应(可选)。
- 按下表加入各成分配制酶切反应体系。
- PCR产物直接酶切推荐反应
- 按下表加入各成分配制酶切反应体系。
成分 用量 PCR产物 10μL 无核酸酶水 7μL 10×SwiftOne缓冲液 2μL SwiftCut ApaI内切酶 1～2μL - 轻轻混匀并瞬甩几秒钟。
- 37℃孵育15～30分钟。
- 按下表加入各成分配制酶切反应体系。
附录参考：
常见DNA中ApaI酶切识别位点数：
| λDNA | φX174 | M13mp18/19 | pBR322 | pUC57 | SV40 | Adeno2 | pUC18/19 |
| 1 | 0 | 0 | 0 | 1 | 1 | 12 | 0 |
双酶切或多酶切：
- 每种酶的用量为1μL，并根据需要适当扩大反应体系；
- 所有酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10；
- 若所选用内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度较低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。
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